通常所說的紫外光顯微鏡是使用波長在380mm-360nm以下的紫外光形成像的顯微鏡，這種顯微鏡zui初是被用來增大分辨力的，在現(xiàn)代它主要用于對紫外光有選擇吸收物質(zhì)的顯微分光進行光度測量。
在紫外光顯微鏡的應(yīng)用中，首先可能會遇到的就是載玻片、蓋玻片和透鏡的材料問題。通常大多數(shù)的普通玻璃都會大量地吸收340nm以下波長范圍的光，且紫外光不能透過玻璃透鏡形成像；而且所有的透明塑料一般都具有相同的透射特性，因此也不得不使用石英、熒石或鏗熒石等價格昂貴的材料，現(xiàn)代技術(shù)已能用這些材料制造出具有短焦距和高數(shù)值孔徑的紫外光物鏡。
另外，必須采用在紫外光區(qū)域能夠發(fā)射足夠數(shù)量輻射能的高壓氣體放電燈，一般白熾燈在紫外光區(qū)域內(nèi)的輻射產(chǎn)量幾乎為零。同時在紫外光顯微鏡中所使用的標本也必須粘在石英載玻片和石英蓋玻片之間，石英載玻片比一般玻璃載玻片更小、更薄，尺寸為25mm ×37.5mm× 0.5mm，且石英蓋玻片也必須比一般玻璃蓋玻片薄得多，大約為0.025mm。在使用這種蓋玻片時，必須先矯正紫外光物鏡。更須注意的是，封藏介質(zhì)和浸潤液也須是能夠透過紫外光的，適宜使用無水甘油。
實際上，早在1904年柯勒已制造出用于紫外光的石英物鏡，這種物鏡可以透過從一個弧光燈中分離的波長為275nm的紫外光，且對球面差有一定的矯正作用。使用紫外光顯微鏡，在分辨力上確實顯示出某種程度的提高，這一點是不容置疑的。同時在使用波長為265nm的紫外光拍攝未染色的人骨髓細胞涂片時，由于細胞核中的核酸顯示強烈的吸收，細胞核顯示出清晰的核質(zhì)結(jié)構(gòu)和較高的分辨力，所以盡管照片使用了很高的放大倍數(shù)，仍不能出現(xiàn)空放大。
同時這里要說的是，紫外光顯微鏡在分辨力上的增大并不能*令人滿意。首先由于波長對場深的影響，使得分辨力的增加必須要求是很薄的物體標本。此外，在紫外光顯微鏡中對于色差問題的解決，近年來已取得了一些進展，主要可通過兩種方法實現(xiàn)。
一種方法是使用反射物鏡，它通常不會受到色差的損害，但對于較高孔徑物鏡的制造是較為困難的，另一種方法就是采用由不同的紫外光透明材料制造的折射物鏡。在此，zui主要的問題就在于尋找用于這種的復(fù)雜折射系統(tǒng)的不吸收光而且無熒光的透鏡粘著劑，目前已經(jīng)找到一些較為合適的粘著劑，但它們對于溫度上的巨大變化也是較為靈敏的。它要求集光器和目鏡必須滿足不太高的光學(xué)要求，一般采用石英制造；與此同時，光源只能用氣體放電燈，特殊的電弧燈雖能在紫外光的一定區(qū)域進行發(fā)射，但是往往也具有較低的光產(chǎn)量；除此之外濾光片和單色儀對于分離所要求的紫外光也是必需的，但同時，這也會引起光能量較大的損失。
那么，能不能使用波長比250nm-350nm的范圍的遠紫外光來成像呢?實際上，這種遠紫外光顯微鏡在物理學(xué)上是有意義的，但在生物學(xué)上卻沒有多大的價值的，因為大多數(shù)生物學(xué)材料在紫外光范圍所顯示的吸收是并不處于遠紫外的光譜區(qū)域的。
目前所知道的，特別是在260nm-320nm的范圍內(nèi)的紫外光對于許多生物學(xué)材料具有較大的影響，同時在生物界所存在的某些重要的物質(zhì)又在這一光譜區(qū)域內(nèi)表現(xiàn)出了很強的選擇性吸收。所形成的在265nm波長上的反差是由于核酸的特異性吸收，蛋白質(zhì)在280nm-320nm范圍內(nèi)也表現(xiàn)出選擇性的吸收，這就使得使用紫外光分光光度計來進行核酸、蛋白質(zhì)等物質(zhì)的分布定位和定量研究進一步成為可能，更成為了紫外光顯微鏡的zui重要、zui廣泛的用途。本文來源http://www.chxwj.com